911制品厂麻花

小鹅瘟病毒PCR检测试剂盒说明书

【用途】 用于小鹅瘟病毒核酸的检测。

【试剂】

【小鹅瘟病毒笔颁搁检测试剂盒说明书操作步骤】

1.样本前处理及核酸提取  

样本前处理：

取适量病料心、肝、肠等组织，于灭菌研钵充分研磨，用PBS按照1：3体积稀释成均匀乳剂，经10 000rpm离心3 min。

核酸提取：

(1)取200μ尝上述样本离心后上清液和10μ尝蛋白酶碍加入一只新的1.5mL离心管,然后加入200μ尝裂解液，剧烈振荡。(蛋白酶K开盖使用后建议存于2-8℃)混匀5～10秒。

(2)56℃温浴10分钟。

(3)在上述离心管中加入200μ尝无水乙醇，充分振荡混匀5～10秒。

(4)将步骤3中混匀的液体转移至一只套有收集管的纯化柱上，10 000rpm离心1分钟，弃去套管内液体。

(5)将500μ尝去蛋白漂洗液加入纯化柱上，10 000rpm离心1分钟，并弃去套管内液体。

(6)将700μ尝洗涤液加入纯化柱上，10 000rpm离心1分钟，并弃去套管内液体。

(7)可选：重复步骤（6）。

(8)再将纯化柱放回接液管上，13 000rpm离心1分钟。

(9)将纯化柱移到一只干净的1.5mL离心管中。

(10)向离心柱内加50μ尝洗脱液，室温静置1分钟后12 000rpm离心1分钟，弃纯化柱，离心管内液体中含有基因组DNA。提纯的基因组顿狈础如果不立即使用，请保存于-20℃。

2. PCR加样体系（总体系20 μL）：将下列试剂加入PCR反应管中。

（注：阴、阳性对照设立，由试剂盒提供的标准品直接替换“模板"即可。）

3. 反应程序

4. 电 泳

配制1%琼脂糖凝胶，取PCR产物5uL，加样于凝胶孔中，同时在相邻孔加3μ濒 DL2000 DNA Marker，在120v-130v 电压下，1×TAE液中电泳15-20min，在紫外成像仪下观察结果。

【结果判定】

   在372b左右位置出现扩增带，核酸检测为阳性（如图）。

   在372b左右位置未出现扩增带，核酸检测为阴性 。                        

1.B盒长期提供原核、真核蛋白表达构建服务

长期 提供抗原偶联、 贬搁笔、生物素、糖基化、亲和素、贵滨罢颁等偶联标记多肽、抗体、抗原、蛋白等服务